Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту

Типология четырех групп крови была установлена врачом, австрийцем по происхождению, Карлом Ландштейнером. Открытие было произведено в тридцатых годах прошлого века и удостоилось Нобелевской премии.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тестуРаспространенность групп крови и резус-фактора

Суть данной системы классификации крови «АВ0» заключается в присутствии у человека и млекопитающих антигенов на эритроцитах. Стандартных антител в крови (гамма-глобулинов) к ним в плазме нет.

Исходя из этого, реакция «антиген плюс антитело» используется для установления данных о группе крови. Антигены красных кровяных клеток вида «А» соединяются с антителами «ά», соответственно «В» примыкают к «β».

Отталкиваясь от этого, существуют следующие типы крови:

  • Первая группа, 0 (ά, β) —эритроциты данного типа крови лишены антигенов;
  • Вторая, А (β) — обладает антигеном А с антителом β;
  • Третья, В (ά) — обладает антигеном В и антителом ά;
  • Четвертая, АВ (00) —данный вид вообще не содержит антител, однако обладает двумя антигенами.

1 группа крови считается самым распространенным, а четвертый редчайшим. В России самый распространенный вид крови – второй.

Метод определения цоликлонами

Подобные подсказки дают люди, которые обитают в интернете и подбирают любую информацию, особо в этом не разбираясь. Иногда понимая ее очень специфическим образом.

Действительно, существует концепция правильного питания в зависимости от группы крови, а также различные учения, связывающие с ней характер личности. Но эти теории разрабатывалось для выбора наиболее адекватного и полезного рациона питания, предотвращения заболеваний.

Лучше хотя бы просто зайти на специальные медицинские сайты и форумы, чтобы ознакомиться с профессиональной и качественной информацией.

Цоликлоны представляют собой искусственные аналоги сывороток. Они в своем составе содержат синтетические суррогаты агглютининов ά и β. Определение группы крови цоликлонами в медицинской среде считается методом, дающим наиболее точные результаты. Второе наименование анализа «эритротесты».

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тестуЦоликлоны

Данная методика определения группы крови является самой качественной на данный момент. Предполагаемая агглютинация осуществляется между красными кровяными тельцами пациента и агглютининами данных цоликлонов.

Результаты данного метода также расшифровываются, как и при проведении анализа методом сыворотки. Данный способ определения группы крови не нуждается в применения двух серий образцов для анализа, в отличие от стандартного метода.

Также в этом методе имеется специфическая особенность: четвертая группа крови в обязательном порядке определяется со специальным цоликлоном «анти-АВ».

Метод определения цоликлонами

Для осуществления типового анализа на определение группы крови с помощью стандартных сывороток, которые содержат определенные антигены, также необходимы эритроциты человека (берутся при заборе крови из пальца).

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тестуОпределение групп крови стандартными сыворотками

Сыворотки заготавливаются из плазмы донора крови на станциях переливания и имеют срок хранения. Обязательным требованием являются условия хранения лабораторного материала.

На ампулах обязательно обозначается серийный номер. Для точности данного метода необходимы сыворотки нескольких серий, во избежание неточного результата анализа.

Алгоритм проведения анализа на определение групп крови следующий:

  • Для проведения анализа данным методом необходимы большие капли четырех типов сывороток (достаточно только третьей и второй, но для точности результата требуется еще первая и четвертая).
  • В сыворотку добавляют исследуемую кровь и перемешивают (пропорция приблизительно 1:10). Пять минут образцы крови и сыворотки аккуратно смешивают.

По истечении пяти минут, можно получить результаты анализа крови. В крупных частичках сыворотки происходит осветление, в одних появляются маленькие хлопья (реакция свертывания и выпадения в осадок), в других этого не происходит.

Варианты и расшифровка анализа на выявление группы крови могут быть следующие:

  • агглютинации отсутствует в обеих пробах сывороток третьего и второго типов ( дополнительные первая и четвертая) — это первый тип крови;
  • свертывание происходит во всех, за исключением второй — это говорит о 2 группе крови;
  • если агглютинация отсутствует только с третьим типом сыворотки — это 3 группа крови;
  • если же свертываемость происходит во всех образцах — это 4 группа крови.

В случае, когда данные сыворотки представлены в правильном порядке, на пробах обозначены подписи, то определиться с результатом исследования легко: если отсутствует свертывание, то тип крови установлен автоматически.

Могут возникнуть ситуации, когда видимость склеивания нечеткая.

В этом случае исследование крови проводится второй раз, мелкие реакции склеивания и выпадения в осадок наблюдают под микроскопом.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тестуЦоликлоны

Данное тестирование крови дает возможность определить группу крови и ее резус фактор практически в любых домашних условиях. В экспресс-наборе имеется специальная карточка, в которой проделаны вмятины.

Главное преимущество экспресс-теста — это скорость анализа и удобство при проведении. Результат исследования известен приблизительно по истечению пяти минут.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тестуЭкспресс-тест

Помимо стандартных антител, также применяется «анти-D». Он дает данные о резус- факторе пациента. Для данного анализа кровь подходит практически в любом виде. Специфические реагенты уже входят в состав экспресс-методики.

Перед переливанием или серьезным хирургическим вмешательством группа крови перепроверяется с целью абсолютной точности данных. Очень важна также индивидуальная совместимость человека, помимо групповой.

Экспресс-методика

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тестуЭкспресс-тест ПОДРОБНЕЕ ПРО:  Ультрафиолетовое облучение крови (УФОК): действие, аппараты

Источник: https://ginekoloz.ru/kliniki/ekspress-test-opredeleniya-gruppy-krovi/

Методики определения групп крови, описание таблицы

Практически каждый человек хотя бы единожды за свою жизнь проходил тест для установления принадлежности группы крови. О методах проведения данного анализа и об их достоверности пойдет речь далее.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту

Для чего проводится диагностика?

Группа крови – это определенный ряд антигенов, размещенных на поверхности эритроцитов, которые и определяют их специфичность. Таких антигенов известно очень много, поэтому принято единую классификацию крови по АВО и резус-фактору.

Этот показатель в обязательном порядке определяется у пациентов перед хирургической операцией, военным, полицейским и другим категориям людей, которые могут потребовать срочного переливания крови.

Стандартная методика определения группы крови

Самый распространенный метод исследования данного показателя – это способ с применением стандартной сыворотки. Эта диагностика определяет общепринятые антигены по системе АВО.

Изогеммагглютинирующая сыворотка представляет собой совокупность специальных антител к наружным частичкам эритроцитов.

Если находится совместимый антиген, на который могут воздействовать антитела, то формируется комплекс, способствующий началу иммунно-защитного механизма.

Вследствие этого происходит склеивание эритроцитарных клеток крови (агглютинация). Если подобное происходит, то делается вывод о несовместимости крови.

Данные сыворотки изготавливаются из крови доноров по специальной системе, подразумевающая под собой извлечение плазмы, в которой и содержать антитела, после чего ее разводят изотоником – хлорид натрия, это проходит в несколько этапов:

  • В емкость наливают 1 мл воды, в которой растворено 0,9% обычной соли.
  • В эту же пробирку вносят такое же количество разведенной плазмы.
  • Затем 1 мл данной жидкости вносят в емкость с изотоником.

Процесс позволяет получить соотношение 1:256. Если методика разведения будет нарушена, то есть большая вероятность получения ошибочных результатов.

Проведение исследования

На поверхность планшета наносится 0,1 мл каждой сыворотки в район, где нанесена нужная пометка. За тем берется исследуемая кровь объемом 0,01 мл для каждого образца. И затем проводится смешивание каждой капли сыворотки с кровью.

Спустя пять минут проводят диагностику. Тестирование считается положительным, если прошла реакция агглютинации. Исходя из результатов анализов, выполняется построение таблицы, в которую они и заносятся.

  • Таблица результатов теста на группу крови с применением стандартных сывороток.
  • Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту
  • Методика перекрестных реакций

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту

В этом случае, чтобы определить агглютиноген используют цоликлоны. Иначе стандартные сыворотки с технологией параллельного выяснения благодаря эталонным эритроцитарным клеткам.

Два этих способа весьма сходны между собой. Но различия все, же есть.

На поверхность, на которую предварительно помещаются различные сыворотки, наносят по небольшой капле обычных эритроцитов. Затем кровь разделяют на фракции при помощи центрифуги. И форменные элементы добавляют к стандартным сывороткам, а плазменную часть – к стандартным эритроцитарным клеткам. Оценивание результатов проводят через пять минут и показатели отмечают в таблице.

Благодаря данной методике исключаются ошибки при исследовании.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту

Метод с использованием цоликлонов

  1. Если нет возможности определить группу крови стандартными сыворотками, то используют данную методику.
  2. Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту
  3. Цоликлоны – гибридные антитела, которые получают из в-лимфоцитов крови мышей.
  4. Последовательность проведения диагностики такая:
  1. После нанесения отметок на планшет, которые соответствуют виду цоликлона, наносится раствор.
  2. К каждому образцу цоликлона вносят одну каплю диагностированной крови.
  3. Оценка результатов через пять минут.
  4. Для данной методики необходимо соблюдать специальные условия. Они включают в себя пригодность цоликлонов, температуру в помещении и уровень влажности.

Результаты анализов считаются позитивными в том случае, когда при смешивании данных фракций наблюдается реакция агглютинации. Если подобное произошло в двух образцах, то считается, что кровь относится к четвертой группе. Если реакция не наблюдается вовсе, то к первой. Диагностические ошибки в данной методике встречаются не часто.

Быстрый способ «Эритротест»

Выше перечисленные способы используются в медицине уже долгое время и распространены по всему миру. Но ввиду того, что отрасль постоянно развивается, вводятся быстрые диагностические методы по установлению принадлежности к группе крови. Таким нововведением считается и «Эритротест».

Чтобы определить показатель данным способом необходимо иметь следующее оборудование:

  • Стандартный планшет с пятью лунками
  • Скарификатор для прокола и получения биологической жидкости
  • Стеклянная пипетка с резиновой грушей
  • Пипетка для забора реактивов
  • Палочки для смешивания компонентов

Основное преимущество эритротеста состоит в том, что исследование не требует дополнительных условий и доступно в тот момент, когда проведение стандартной диагностики невозможно. Последовательность проведения

Читайте также:  Сепсис крови: с синегной палочкой, что это такое, причины, лечение, последствия и прогноз

В углублениях планшета размещают цоликлоны к антигенам поверхностного типа и основному, который отвечает за наследственную передачу резус-фактора. В последнюю лунку добавляют контрольную сыворотку, которая исключит ошибочный результат и верно укажет на принадлежность к той или иной группе.

  • Оценивание результатов анализа проводится с помощью таблицы, в ней указываются возможные результаты тестирования.

Классификация по системе АВО

Группа крови, определение ее проводится исходя из специально разработанных норм. Существует определенная таблица, которая характеризует каждую группу крови.

Группы Описание
I (0) Эритроцитарные антигенные качества не наблюдаются
II (А) Присутствие антигена А
III (В) Наличие на поверхности эритроцитарных клеток антигена В
IV (АВ) Присутствие обоих антигенов

Видео: Методы определения групп крови:

Источник: https://sosudask.ru/gruppa-krovi-opredelenie/

Определение группы крови: цоликлоны, стандартные сыворотки и перекрестный способ

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

  • Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?
  • Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тестуцоликлон анти-А;
  • цоликлон анти-В;
  • цоликлон анти-D;
  • – раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тестуНанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

 Расшифровка результатов определения группы крови

  • если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);
  • если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту

AB (IV)

Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

  • если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
  • если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту

AB (IV)Rh-

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).

Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:

  • Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
  • Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Стеклянные палочки
  1. Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
  2. Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
  3. Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.

Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.

Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками

Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать.

Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин.

При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV).

Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).

Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.

  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.

  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными.

Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при  реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают.

Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Источник: https://anest-rean.ru/gruppa-krovi/opredelenie/

Методы определения группы крови

Каждому человеку полезно запомнить свою группу крови. Это может неожиданно пригодиться при чрезвычайных ситуациях. Не зря у военнослужащих отмечается группа крови на гимнастерке или жетонах. Проблемы с тем, как определить группу крови, не существует.

В крупных лечебных учреждениях этим занимаются лаборатории. Но даже в небольших сельских амбулаториях имеются стандартные наборы для определения группы, а провести анализ умеют все врачи и средние медицинские работники.

Самостоятельно делать это ни к чему, когда есть специалисты.

Какая группа крови у ребенка можно предположить по родителям. Например, зная, что у родителей вторая, третья или четвертая, не стоит надеяться, что у ребенка будет первая.

Советы для домашнего определения

Подобные советы дают люди, которые «живут» в интернете и собирают любую информацию без разбора. Порой переиначивают ее на свой лад.

Действительно, имеется теория питания в зависимости от типа крови и проведены попытки связать с ней характер личности. Но это разрабатывалось для подбора наиболее подходящего рациона, предотвращения болезней. О связи типа личности с номером крови даже психологи перестали говорить.

Тем более, нельзя судить по любимым блюдам или наклонности к лидерству о своей группе.

В домашних условиях что-либо узнать лучше из полноценных статей, консультаций специалистов. Возможно, имеются медицинские документы (амбулаторная карта, выписки из стационара), в которых есть сведения о вашей крови.

По желанию доноров и пациентов стационаров в паспорт можно проставить печать с указанием этих сведений.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту Подобные нашивки применяются на армейской форме

Кто придумал группы крови

Первооткрывателем четырех групп крови является австрийский ученый и врач К. Ландштейнер, получивший за это Нобелевскую премию по медицине в 1930 году. Открытие позволило предотвратить смертельные исходы по причине переливания, изучать предварительно совместимость донорских признаков и реципиента.

Суть предложенной системы АВ0 заключается в наличии у человека и животных антигенных структур на эритроцитах. Типовых антител (гаммаглобулинов) к ним в плазме не имеется. Поэтому реакцию «антиген + антитело» можно использовать для определения.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту Распространенность групп крови по национальному признаку

Склеивание эритроцитов происходит во время встречи антигена со своим антителом. Такая реакция называется гемагглютинацией. Она видна при проведении анализа в виде мелких хлопьев. Определение группы крови основывается на получении картины агглютинации с типовыми сыворотками.

Антигены эритроцитов типа «А» связываются с антителами «ά», соответственно «В» с «β». По составу крови выделены:

  • I, или 0 (ά, β) — на поверхности эритроцитов совсем нет антигенов;
  • II, или А (β) — содержат антиген А с антителом β;
  • III, или В (ά) — имеется антиген типа В с антителом ά;
  • IV, или АВ(00) — имеет оба антигена, но не содержит антител.
Читайте также:  Кровь из носа у ребенка: что делать, как остановить, причины, лечение носового кровотечения

Антигены имеются у зародыша человека уже в эмбриональном периоде, а антитела (агглютинины) появляются в сыворотке новорожденных в течение первого месяца жизни.

Стандартное определение группы крови (простой метод)

Для проведения анализа на группу крови нужны эритроциты пациента (берутся из капли крови) и стандартные сыворотки, содержащие известные антигены.

Сыворотки изготавливаются из донорской крови на «Станциях переливания», имеют сроки годности, требуют соблюдения условий хранения. На ампулах указывается номер серии. Для точного анализа берется два набора сывороток разных серий. Это делается с целью исключения ошибок.

На плоской тарелке двумя рядами помещают по крупной капле четырех сывороток (достаточно только III и II, но для контроля берется еще 1 и 1V). Разными стеклянными палочками (удобно пользоваться глазными пипетками) в капли сывороток вносят исследуемую кровь (соотношение должно получиться примерно 1:10) и осторожно помешивают.

Пять минут тарелку покачивают, давая возможность сывороткам хорошо перемешаться с кровью.

Расшифровка результатов

Проходит 5 минут, и можно оценивать результаты анализа. В больших каплях сыворотки наступает просветление, в одних образуются мелкие хлопья (реакция агглютинации), в других их нет. Здесь возможны варианты:

Ознакомьтесь со статьей:Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тестуКакие группы крови несовместимы?

  • если агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками III и II групп (+ контрольные 1 и 1V) — это первая группа;
  • если свертывание отмечается во всех, кроме II — это указывает на вторую группу;
  • при отсутствии агглютинации только с III сывороткой — устанавливается третья группа крови;
  • если свертываемость отмечается во всех пробах, включая 1V-контрольную — группа четвертая.

Когда сыворотки расположены в правильном порядке, на тарелке проставлены подписи, то ориентироваться легко: где нет агглютинации, такая и группа.

Бывают случаи, когда склеивание видно неясно. Тогда анализ переделывают, мелкую агглютинацию смотрят под микроскопом.

Метод перекрестной реакции

Для уточнения группы при невыраженной агглютинации применяют метод двойной перекрестной реакции со стандартными эритроцитами. В данном случае известными являются не сыворотки, как в простом методе, а эритроциты. У пациента кровь набирают в пробирку, центрифугируют и для исследования пипеткой откачивают сверху сыворотку.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту Стандартные антисыворотки

На плоскую белую тарелку капают 2 большие капли сыворотки от пациента. В них добавляются стандартные эритроциты А (II) и В (III) групп крови. Постепенно размешивают, покачивают тарелку.

Результат оценивается через 5 минут:

  • если агглютинация наступила в обеих каплях, группа первая;
  • если нет ни в одной пробе, группа четвертая;
  • если в одной из примененных известных эритроцитов, то группа определяется по наличию или отсутствию свертываемости в капле.

Определение группы цоликлонами

Цоликлоны — это синтетические заменители сывороток. Они содержат искусственные заменители агглютининов ά и β. Их называют эритротестами «Цоликлон анти-А» (розового цвета) и «анти-В» (синего). Ожидаемая агглютинация происходит между эритроцитами исследуемой крови и агглютининами цоликлонов.

Методика не требует использования двух серий, считается более точной и надежной. Проведение и оценка результатов такие же, как в простом стандартном методе.

Вид цоликлонов Группа крови
Результат агглютинации Анти-А Анти-В
0(I)
+ A(II)
+ B(III)
+ + AB(IV)

Особенность: четвертая группа АВ(IV) обязательно подтверждается реакцией агглютинации со специфическим цоликлоном «анти-АВ» и отсутствием неспецифического склеивания эритроцитов в изотоническом растворе хлорида натрия.

Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»

Метод позволяет определить группу и резус фактор в лаборатории и полевых условиях. В состав набора входит карточка с лунками. На дно лунок уже нанесены высушенные реагенты. Здесь, кроме «анти-А», «анти-В» и «анти-АВ» используется «анти-D», который дает результат резус-фактора.

Можно использовать кровь в любом виде, подойдет соединение с консервантом и взятая из пальца.

Перед исследованием на карточке записывается фамилия пациента, в каждую лунку вносится капля воды для растворения ингредиентов. Затем отдельными палочками в лунки с реактивами добавляют кровь и слегка перемешивают. Окончательный результат «читают» спустя три минуты.

Группа крови всегда перепроверяется при необходимости переливания. Одновременно контролируют групповую и индивидуальную совместимость. Ведь, на самом деле, в крови человека обнаружено гораздо больше антигенных свойств, чем в системе АВ0. Просто они у большинства населения слабо проявляются.

Но у пациента с тяжелыми заболеваниями, изменяющими свойства крови и аллергизирующими организм, они становятся определяющими, требуют считаться с наличием и уровнем в крови. Поэтому знание пациентом собственной группы добавляет уверенности в результате исследования.

Источник: https://icvtormet.ru/krov/metody-opredeleniya-gruppy-krovi

Определение группы крови цоликлонами: алгоритм действий, резус-фактора, как с помощью, таблица

Определение группы крови цоликлонами делают беременным женщинам перед родами, больным людям — до проведения хирургической операции, и когда может понадобиться переливание крови. Есть и другие способы с применением различных веществ, но этот метод самый точный и применяется чаще всего.

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту

Что такое цоликлон

Цоликлоны для определения группы крови представляют собой антитела, получаемые по специальной технологии. Чтобы получить цоликлоны, используют лабораторных подопытных крыс. Грызунам делают инъекцию специального средства, а затем берут кровь из брюшины, она включает вещества, которые нужны для анализа.

Цоликлоны по своему составу относятся к иммуноглобулинам, они реагируют с антигенами, находящимися на оболочке эритроцитов. Типы этих веществ используются для выявления группы. Во время анализа цоликлоны разных видов вступают в реакцию с агглютиногенами, это дает возможность выявить группу и резус-фактор человека.

Препарат производят в жидком виде в бутылках по 5 и 10 мл. Каждый вид препарата обладает своими характеристиками.

Цоликлоны отличаются преимуществом перед другими сыворотками, т.к. не требуют долгой подготовки к обследованию и дают возможность сделать его быстро. Они не представляют собой человеческие клетки, ввиду чего при контакте с ними медики не смогут заразиться какой-либо инфекцией.

Подготовка к процедуре

В кабинете должна отсутствовать пыль, мухи, насекомые, которые могут помешать выполнению теста. Помещение должно быть хорошо освещено.

Флакон с цоликлонами должен быть плотно закрыт, чтобы реагенты не пересохли, в противном случае достоверность анализа снизится. Для определения группы крови и резуса при помощи цоликлонов нужна специальная подготовка.

В лабораторном кабинете температура воздуха может быть +15…+25ºC, в этом случае результат будет точным.

Перед анализом подготавливают нужные медицинские инструменты:

  • пробирку;
  • планшет, на который наносят реагент;
  • пипетки;
  • палочки для изъятия лабораторных образцов.

Если медицинский работник не только выполняет исследования, но и берет анализ у пациента, то надо подготовить:

  • жгут;
  • спирт для медицинской обработки;
  • одноразовый шприц;
  • пробирки;
  • ватный тампон;
  • салфетки;
  • специальный лабораторный маркер.

Как проводится исследование

Алгоритм определения группы крови цоликлонами состоит в следующем. Лабораторное тестирование осуществляется при помощи 3 видов этих веществ:

  • «Анти-A» красного цвета, такой же оттенок имеет бутыль, крышка и этикетка препарата.
  • «Анти-B» имеет синий цвет, а также крышку, бутыль и этикетку, окрашенные в синий тон.
  • «Анти-D» — бесцветный и находится в прозрачной бутылке.

При определении резус-фактора цоликлонами нельзя применять некачественные реагенты. Если флакон имеет дефекты или внутри жидкости есть осадок, то реагент потеряет свое действие.

Чтобы определить группу, медицинский работник наносит цоликлоны на лабораторную пластину, выполненную в виде таблицы. Наносятся реагенты разных типов (A, B и D). Каждый образец подписывается.

Цоликлон наносят на отмеченный участок. Каждый вид реагента берут своей пипеткой.

Рядом с сывороткой капают по 1 капле крови человека, затем чистой палочкой ее размешивают с реагентами. Через несколько секунд начнется реакция. Лаборант проводит наблюдение за реагентами 3 минуты. Потом можно расшифровывать результат анализа.

Расшифровка результатов

Определение типа крови с помощью цоликлонов происходит при расшифровке результатов анализов. Если в образце нет реакции склеивания, значит, в анализе нет агглютиногена данного типа. В этом случае анализ относится к 1 группе. Если клетки вступают в реакцию с реагентами «Анти-A» и «Анти-D», значит, у человека 2 тип (A).

Взаимодействие эритроцитов с цоликлонами типа «Анти-B» и «Анти-D» показывает, что у человека 3 группа (тип B). Если тельца вступили во взаимодействие со всеми видами цоликлонов, то у больного 4 группа крови (тип D).

При выявлении группы крови при помощи этих реагентов не придется проводить дополнительную проверку, т.к. цоликлоны не имеют каких-либо добавок, вызывающих неправильную реакцию.

Группа крови определяется в медицинском учреждении, анализ осуществляется в специальной лаборатории.

Таблица расшифровки результатов исследования:

Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту

Этот тест позволяет узнать жизненно необходимые данные о группе и резус-факторе пациента. Результаты позволяют оказать медицинскую помощь и перелить кровь больному после операции. Чтобы узнать свою группу, можно провести анализ в лаборатории любого медицинского учреждения. Информацию заносят в анкету пациента и хранят полученные данные в поликлинике в течение нескольких лет.

Источник: https://MedicalOk.ru/gruppa-krovi/opredelenie-tsoliklonami.html

Определение резус-принадлежности крови

Определение резус-принадлежности крови С ПОМОЩЬЮ СТАНДАРТНЫХ СЫВОРОТОКОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ ЦОЛИКЛОНОВ

Определение резус-принадлежности крови С ПОМОЩЬЮ СТАНДАРТНЫХ СЫВОРОТОК

Понятие резус-фактор — слишком общее (и устаревшее). Система резус антигенов многообразна. Современные методы исследования позволяют делать тесты индивидуально по резусу D, С, с, Е, е. Кроме этого, необходимо выявлять случаи со слабым D-антигеном или вариабильным D-антигеном. Вся эта информация тоже крайне важна при подборе донора в случае необходимости.

Читайте также:  Тромбоциты в крови: норма, повышены, понижены, у мужчин, женщин, ребенка, расшифровка

Ход работы. Определение резус-принадлежности крови проводится с помощью стандартной универсальной сыворотки «антирезус» для всех групп крови. В пробирку вводят одну каплю (0,05 мл) исследуемой  крови   или  эритроцитов   и  добавляют   1—2  капли  стандартного универсального реагента «антирезус» той же группы крови.

Перешивают    содержимое    путем    встряхивания    пробирки и помещают ее на водяную баню на 5 минут при температуре 370С, так как иммунная реакция с антигеном требует оптимальной температуры.   Как правило, агглютинация наступает в течение 3-5 мин.

  По истечении этого времени  для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 2—3 мл изотонического раствора хлорида натрия и перемешивают  (но взбалтывая!), 2—3 раза переворачивая пробирку. 

В некоторых случаях не представляется возможным определение резус-принадлежности реципиента, тогда пользуются индивидуальной пробой на резус-совместимость крови донора и реципиента.

На чашку Петри наносят 2 капли сыворотки крови больного и маленькую каплю переливаемой крови, их смешивают и ставят на водяную баню (42-45 °С) на 10 мин. Если наступила агглютинация, то кровь донора несовместима с кровью реципиента и ее переливать нельзя.

Трактовка результатов. Пробирки просматривают на свет невооруженным глазом. При положительном резуль­тате агглютинация выражается в появлении хлопьев из склеенных эритроцитов на фоне просветленной жидкости.

При отрицательном результате жидкость в пробирке остается равномерно окрашенной, без признаков агглю­тинации эритроцитов. Результат учитывают как истинный после проверки контрольных, образцов, т. е.

при поло­жительном результате со стандартными резус-отрицательными эритроцитами, одногруппными с исследуемой кровью. 

 ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ ЦОЛИКЛОНОВ

 Цоликлоны изготавливаются из асцитной жидкости мышей  – носителей анти-D и анти-С гибридом. Цоликлоны Анти-D, Анти-С, Анти-с предназначены для определения резус принадлежности крови.

Ход определения. На планшет индивидуальными пипетками наносятся цоликлоны Анти-D, Анти-С, Анти-с по одной большой капле (0,1мл). Рядом с каплями антител наносится по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01 мл). Кровь смешивается с реагентом.

Наблюдается ход реакции с цоликлонами визуально при легком покачивании планшета в течение  трех минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек.

, но наблюдение следует вести 3 минуты ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности резус-антигена. При использовании цоликлонов термостатировать не требуется, 

Интерпретация результатов. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов.

Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья.

При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

  • Наличие агглютинации с Анти-D, Анти-С или Анти-с цоликлонами свидетельствует о том, что кровь резус-положительная, а отсутствие агглютинации – что кровь резус-отрицательная.
  • Определение группы крови: по цоликлонам, стандартным сывороткам, экспресс тесту

Источник: https://krasgmu.net/publ/6-1-0-11

Б. Определение группы крови с помощью цоликлонов (моноклональных антител)

Используются стандартные наборы
моноклональных антител высокой
специфичности, содержащие реагенты
(цоликлоны) анти-А, анти-В и анти-АВ. Для
каждого определения группы крови
достаточно применять по одной серии
реагентов (цоликлонов) анти-А и анти-В.

На маркированную пластинку капают в
три точки, исследуемые эритроциты (0,02
мл). Рядом с ними, под соответ­ствующими
надписями, помещают цоликлоны анти-А,
анти-В и анти-АВ по одной капле (0,1 мл) в
соотношении 1:5… 1:6. После смешивания
реагентов и крови стеклянными палочками
(уголками предметных стекол), пластинку
периодически покачивают, ход реакции
наблюдают в течение 3 мин.

Оценка результата проводится по наличию
агглютинации эритроцитов с соответствующим
реагентом.

Возможны четыре варианта определения
результатов:

а) Агглютинация во всех трех каплях
цоликлонов – это значит, что исследуемые
эритроциты содержат оба антигена (А и
В) и кровь принадлежит к группе АВ (IV).

В целях исключения панагглютинации,
которая может наблюдаться у отдельных
больных (миеломная болезнь, ожоговая
болезнь), а также в пуповинной крови
новорож­денных, в случае установления
группы крови АВ (IV)
необходимо провести контрольное
исследование: одну каплю (0,1 мл)
изотонического раствора натрия хлорида
смешать с маленькой каплей (0,01 мл)
исследуемой крови. Реакция агглютинации
должнаотсутствовать.

  • б) Агглютинация с цоликлонами анти-А и
    анти-АВ – это означает, что исследуемые
    эритроциты содержат только антиген А
    и кровь принадлежит к группе А (II).
  • в) Агглютинация с цоликлонами анти-В и
    анти-АВ – это означает, что исследуемые
    эритроциты содержат только антиген В
    и кровь принадлежит к группе В (III).
  • г) Агглютинация отсутствует во всех
    трех каплях цоликлонов — это значит, что
    исследуемые эритроциты не содержат
    антигенов А и В, и кровь принадлежит к
    группе 0(I).
  • Оценка результатов определения групп
    крови при помощи цоликлонов приведена
    в таблице:
Группа крови цоликлон «анти-A» цоликлон «анти-B» цоликлон «анти-АВ»
0(I)
A(II) + +
B(III) + +
AB(IV) + + +

Знаком (+) обозначено наличие агглютинации,
знаком (-) ее отсутствие.

При наличии агглютинации со всеми тремя
реагентами (цоликлонами) необходимо
исключить неспецифическую агглютинацию
исследуемых эритроцитов. Для этого, ещё
одну каплю эритроцитов смешивают с
каплей физиологического раствора. Кровь
можно отнести к группе AB(IV) только при
отсутствии агглютинации эритроцитов
в физиологическом растворе.

Подробные сведения по вопросу «Определение группы крови системы аво цоликлонами»

  1. Цоликлоны
    изготавливают из водяночной (асцитной)
    жидкости лабораторных мышей – носителей
    «анти – А» и «анти – В» гибридом.
  2. Цоликлон
    «анти – А»
    (красного цвета)
    представляет собой раствор антител
    «анти – А».

  3. Цоликлон «анти – В»(синего
    цвета) представляет собой раствор «анти
    – В».
  4. Цоликлон «анти – АВ»(неокрашенный)представляет собой смесь
    растворов антител «анти – А» и «анти
    – В» и предназначен для дополнительного
    контроля группы крови О(I).

  5. Срок хранения— 2 года при температуре
    +2°…+6°
  6. Вскрытый флакон можно хранитьв
    закрытом виде при температуре +20…+60в течение 21 дня (дату вскрытия флакона
    обязательно пишут на его этикетке).

  7. Цоликлоны предназначены дляопределения групп крови человека системы
    АВ0 в реакциях гемагглютинации, они
    применяются взамен стандартных иммунных
    сывороток и параллельно с ними.

Цоликлоны предназначены для выявления
в эритроцитах человека антигенов системы
АВ0.

Анализ может проводиться с кровью,
как взятой в консервант, так и без
консерванта, а также и с капиллярной кровью, взятой из пальца. Технология
изготовления цоликлона исключает
возможность его заражения патогенными
для человека вирусами.

  • Определение группы крови проводится в
    помещении с хорошим освещением при
    температуре +150…+250на
    пластинке светлого однотонного цвета
    с чистой сухой обезжиренной поверхностью
    (возможно использование планшетов для
    определения групп крови). Также
    необходимы:
  • — одноразовые пастеровские пипетки для
    нанесения на пластинку капель исследуемой
    крови;
  • — палочки стеклянные (предметные стёкла)
    для смешивания цоликлонов с исследуемой
    кровью;
  • -пробирки с исследуемой кровью (в
    штативе).
  • Проведение исследования. Оценка
    результата:
  • Нанесите на планшет (пластинку)
    индивидуальными пипетками цоликлоны
    «анти–А», «анти–В» и «анти–АВ» по
    одной большой капле (0,1мл) под
    соответствующими надписями (при
    использовании неградуированных пипеток,
    0,1мл – это одна полная капля).

Рядом с каждой каплей раствора антител нанесите маленькую (0,02мл) каплю
исследуемой крови. Соотношение «цоликлон:
кровь» соответствует соотношению «5:1».
Смешайте каждую каплю цоликлона с каплей
крови индивидуальной чистой стеклянной
палочкой.

Наблюдайте за ходом реакции
с цоликлонами, при лёгком покачивании
пластинки (планшета). в течение 3 минут.

Агглютинация эритроцитов цоликлонами
обычно наступает в первые 3–5 секунд,
но наблюдение следует вести 3 минут,
ввиду более позднего появления агглютинации эритроцитов, содержащих
слабые разновидности антигенов АилиВ.

Результат реакции в каждой капле может
быть положительным или отрицательным.

Положительный результат выражается в
склеивании (агглютинации) эритроцитов.
Агглютинаты видны невооружённым глазом
в виде мелких красных зёрнышек, песчинок,
быстро сливающихся в крупные хлопья, а
капля быстро просветляется.

При отрицательной реакции, гемагглютинация
не развивается, капля остаётся равномерно
окрашенной в красный цвет, агглютинаты
(зёрнышки, песчинки, хлопья) в ней не
обнаруживаются.

Объяснение
результатов реакции исследуемой крови
с цоликлонами представлено в таблице.

Результаты реакций с цоликлонами Исследуемая кровь принадлежит к группе
контроль цоликлон цоликлон цоликлон
физраствор(соответствует сыворотке IV группы) «анти – А»(соответствует сыворотке III группы) «анти — В»(соответствует сыворотке II группы) «анти — АВ»(соответствует сыворотке I группы)
ОI
+ + А(II)
+ + В(III)
+ + + АВ (IV)
  1. Знаком
    плюс (+) обозначено наличие агглютинации.
  2. Знаком
    минус (-) обозначено отсутствие
    агглютинации.
  3. При положительной реакции агглютинации
    со всеми тремя цоликлонами, необходимо
    исключить неспецифическую агглютинацию
    исследуемых эритроцитов.
  4. Для этого необходимо отдельно смешать
    одну большую (0,1мл) каплю физиологического
    раствора с маленькой (0,05–0,01мл) каплей
    исследуемой крови.
  5. Кровь можно отнести к группе АВ(IV)
    только при отсутствии агглютинации
    исследуемых эритроцитов в физиологическом
    растворе.
  6. При наличии агглютинации, при этом
    контрольном исследовании, заключение
    о групповой принадлежности крови не
    делают, образец крови направляют в
    специализированную лабораторию.
  7. Окончательно, групповую принадлежность
    крови (в системе АВ0) устанавливают в
    лаборатории перекрёстным способом –
    по результатам перекрёстного определения:
    антигеновАиВна эритроцитах,антител «анти–А»и«анти–В»в сыворотке.

Источник: https://studfile.net/preview/4021625/page:7/

Ссылка на основную публикацию